Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
3.3.3. Анализ данных
Результаты исследования снижения цитопатического эффекта в основном соответствуют сигмоидальному графику доза-ответ, когда функция представлена графически - концентрация интерферона (логарифм обратной величины разведения интерферона) к поглощению красителя.
Строят график функции концентрации интерферона (логарифм обратной величины разведения) к поглощению красителя для стандартного препарата интерферона и для экспериментальных растворов интерферона. Используя линейный участок графика, рассчитывают концентрацию интерферона в образце путем сравнения реакций для экспериментального и стандартного растворов, используя обычные статистические методы для параллельного анализа.
4. ВАЛИДАЦИЯ ДРУГИХ ПРОЦЕДУР
4.1. ВЫБОР КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР И ВИРУСА
В антивирусных исследованиях интерферона использовался целый ряд других комбинаций клеточных культур и вирусов. Например, EMCV использовался в комбинации с эпителиальной клеточной культурой A549 карциномы легких, вирус Semliki Forest или вирус Sindbis использовались с фибробластами человека, с клеточной культурой амниона человека, вирус WISH или Madin-Darby с почечной клеточной культурой крупного рогатого скота. В каждом случае выбор комбинации клеточная культура/вирус основывается на том, какая из них дает наиболее чувствительный ответ на препарат интерферона, предназначенный для исследования, и дает параллельные реакции при сравнении экспериментального препарата и интерферонового стандарта.
4.2. ВЫБОР РЕАКЦИИ
Процедура окрашивания, описанная выше, оценивает оставшиеся жизнеспособные клетки. Кроме того, применялся целый ряд других реакций, включая окрашивание метиленовым синим или кристаллическим фиолетовым или преобразование тиазолинового синего (МТТ). В каждом случае выбор метода основывался на получении подходящей линейной и чувствительной зависимости между реакцией цвета и количеством жизнеспособных клеток.
4.3. СТАТИСТИЧЕСКОЕ ПОДТВЕРЖДЕНИЕ ДОСТОВЕРНОСТИ
Как и в случае с параллельными биоанализами, данное исследование должно соответствовать обычным статистическим критериям линейности реакции, параллелизма и дисперсии.
4.4. ВАЛИДАЦИЯ ПЛАНИРОВАНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Как и в случае с процедурой микротитрового планшета, необходимо уделять внимание планированию исследования. В частности, необходимо предусмотреть и исключить системные ошибки в результате неслучайного порядка пипетирования и других факторов.
РЕАГЕНТЫ И КУЛЬТУРАЛЬНАЯ СРЕДА
Культуральная среда A (10% неонатальная телячья сыворотка)
RPMI 1640 культурная среда, дополненная при необходимости антибиотиками (пенициллин 10000 МЕ/мл; стрептомицин 10 нг/мл)
L-глютамин, 200 мМ, стерильный
Культуральная среда B (2% эмбриональной коровьей сыворотки)
RPMI 1640 культуральная среда, дополненная при необходимости антибиотиками (пенициллин 10000 МЕ/мл; стрептомицин 10нг/мл)
L-глютамин, 200 мМ, стерильный Эмбриональная коровья сыворотка Окрашивающий раствор Нафталин черный Кислота уксусная ледяная Натрия ацетат безводный Вода
- 450мл
- 5мл
- 490мл
- 5мл
- 10мл
- 0,5 г
- 90 мл - 8,2 г
-1000 мл
Фиксирующий раствор
Формальдегид 40 % -100 мл
Кислота уксусная ледяная - 90 мл
Натрия ацетат безводный - 8,2 г
Вода - 1000 мл
5.7. ТАБЛИЦА ФИЗИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК РАДИОНУКЛИДОВ,
УПОМИНАЕМЫХ В ФАРМАКОПЕИ
Следующая таблица приведена в дополнение к общей статье Радиофармацевтические препараты (0125).
Данные взяты из базы данных National Nuclear Data Center (NNDC) Brookhaven National Laboratory, Upton. N.Y., USA, а также размещены в Интернете по адресу: ’’http://www.nndc.bnl.gov/nndc/nudat/radform.html”.
В том случае, когда был использован другой источник информации (более современные знания), это указывается.
Другие источники информации:
*DAMRI (Departement des Applications et de la Metrologie des Rayonnements lonisants, CEA Gif-sur-Yvette, France),
** PTB (Physikalisch-Technische Bundesanstalt, Braunschweig, Germany),
*** NPL (National Physical Laboratory, Teddington, Middlesex, UK).
Отклонение в периоде полураспада дается в круглых скобках, цифра в круглых скобках является стандартным отклонением, соответствующей последней цифре, в соответствии с “Руководством по выражению отклонения в измерениях”, Международной организации по стандартизации (ISO), 1993, ISBN 92-67-10188-9).
В тексте используются следующие аббревиатуры: eA _ возбужденные электроны, се - конверсионные электроны,
Р' - электроны,
Р+ - позитроны,
Y - гамма-излучение,
Х - рентгеновское излучение.
Радионуклиды Период Эмиссия электронов Эмиссия фотонов
Вид Энергия (мЭв) Вероят Вид Энергия Вероят
ность (мЭв) ность
